1. 固定
- 目的:迅速杀死细胞,并使细胞内的微细结构和成分保持在原来的位置上(废话)
- 方法
- 化学固定法:利用试剂对大分子的交联作用
- 物理固定法:冷冻
- 常用固定剂:; 戊二醛;
2. 包埋
- 目的:使样品中各个细微结构在切片过程中都得到均匀良好的支撑和切片保持连续性以及有足够的强度
3. 超薄切片
- 指厚度在1000Ǻ以下的切片,切片后放置在铜网上(0.5-2mm)
4. 染色
- 重金属盐的染色
- 锇酸染脂肪,铅盐染蛋白质,醋酸铀染核酸
- 正染:样品随厚度吸附不同量的重金属盐,造成标本对电子的散射能力不同,形成图像上的反差
- 负染:重金属沉积在样品的周围,使样品的背景呈电子不透明的黑色,而有样品的凸出地方则没有染料沉积,样品处呈电子透明的白色,从而显示出被检物的形状、大小和表面结构