概念

  • 利用酵母中的报告基因研究蛋白质-蛋白质互作的技术

原理

转录因子的结构

  • 转录因子分为 DNA 结合结构域(DB)和激活结构域(AD

利用融合蛋白研究互作

  • 假设:A、B 蛋白存在互作
  • 制备 A 蛋白-DB 融合蛋白,即诱饵蛋白(bait)
    • 诱饵蛋白利用 DB 结合到启动子区域,等待猎物
  • 制备 B 蛋白-AD 融合蛋白,即猎物蛋白(prey)
    • 若存在蛋白互作,则猎物蛋白被诱饵蛋白捕获,形成完整的转录因子结构,进而启动报告基因的表达

Y2H 的工作原理