凋亡细胞的检测需要与凋亡细胞的特征相结合
形态学检测
特征 1
凋亡具有特别的形态学特征, 如染色体固缩, 并沿核膜分布等
使用 DAPI 对细胞核中的 DNA 进行染色, 可以观察到凝缩在核膜上的 DNA
DNA 检测
特征 2
DNA 断裂, 染色体非整倍化
通过检测 DNA 的断裂情况, 可以判断细胞是否处在凋亡状态:
- DNA 电泳法: 通过一般的琼脂糖凝胶电泳可以检测染色体是否断裂, 可见弥散条带
- TUNEL: 通过末端转移酶将带有荧光标记的 dUTP 插入至 DNA 的缺口 (nick) 中
- 彗星电泳法: 直接对细胞核进行电泳, 凋亡细胞中 DNA 降解片段电泳速度快, 核呈彗星式图案
- 流式细胞术: 通过检测不同细胞的 DNA 含量确定细胞群体中凋亡细胞的比例
凋亡信号检测
特征 3
PS 翻转至膜外侧发出 eat me 信号
在凋亡早期, 位于膜内侧的 PS 将翻转至细胞膜外侧, 作为传递给吞噬细胞的信号. 使用 Annexin V 可以检测向外翻转的 PS.