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在普通荧光显微镜的基础上添加了共聚焦成像系统，以激光为光源，可以重构样品三维结构
原理: 光学切片
- LSCM 通过激光光源与纵向扫描系统实现光学切片
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激光源：提供高强度、单色性好的激发光。激光具有良好的方向性和 coherence，易于聚焦成一个极小的点。
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照明针孔：激光首先通过一个照明针孔。这个针孔的作用是创造一个理想的点光源。
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二向色分光镜：经过照明针孔的光线被物镜聚焦之前，会碰到二向色分光镜。这是一个特殊的分光镜，它像一面“单向镜”：
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反射较短波长的光（如激发光），让其向下传播通过物镜。
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透射较长波长的光（如样品发出的荧光）。
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物镜与样品：被二向色镜反射的激发光，通过高数值孔径的物镜，被聚焦到样品内部的一个极小的点上（衍射极限大小，约200-300纳米）。这个点上的荧光分子被激发，发出荧光。
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荧光信号的收集：样品发出的荧光（波长比激发光长）是向四面八方散射的，但物镜会收集其中一部分，并将其准直成近乎平行的光束，返回显微镜。
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探测针孔：这是整个系统的“灵魂”。返回的荧光光束穿过二向色分光镜（因为其波长较长，被透射），然后到达探测针孔。
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来自焦平面的信号：从焦平面焦点发出的荧光，经过物镜和光路后，会正好汇聚在探测针孔的平面上，并顺利通过针孔，到达后面的探测器。
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来自焦外的杂散光：从焦平面上方或下方发出的荧光，在通过光路后，无法汇聚在探测针孔的平面上，而是在针孔前或后形成一个弥散斑。这个弥散斑绝大部分被探测针孔阻挡，无法到达探测器。
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探测器：通过探测针孔的光信号被高灵敏度的探测器接收，通常是光电倍增管。PMT将光信号转换成电信号
与普通荧光显微镜的对比
- 水平分辨率：高 1.4-1.7 倍
- 垂直分辨率：100-200nm
- 扫描速度会影响图像清晰度